MM_FS_CNJ_0100出口 肉 肉制品二溴磷 残留量 气相色谱法 外标法
MM_FS_CNJ_0100
出口肉及肉制品中二溴磷残留量检验方法
1.适用范围
本方法适用于出口猪肉中二溴磷残留量的检验。
2.原理概要
试样经盐酸酸化，用正己烷提取残留的二溴磷。提取液在－20℃冷贮2h以凝结出脂肪，然后经浓缩定容后，用配有电子俘获检测器的气相色谱仪测定，外标法定量。必要时用气相色谱-质谱检测器法确证。
3.主要试剂和仪器
3.1.主要试剂
盐酸：浓盐酸，36％～38％；
正己烷：重蒸馏；
无水硫酸钠：在650℃灼烧4h，置于干燥器中冷却备用；
硫酸钠溶液：饱和水溶液；
二溴磷标准品：纯度≥99％；
二溴磷标准溶液：准确称取适量的二溴磷标准品，用丙酮配成浓度为0.25mg/mL的标准储备溶液，根据需要再用正己烷稀释成适当浓度的标准工作液。
3.2.仪器
气相色谱仪，配有电子俘获检测器及质谱检测器；
高速捣碎机；
旋涡混匀器；
离心机：0～5000r/min；
多功能微量化样品处理仪或相当者；
离心管：50mL、25mL，具塞；
浓缩瓶：Koderna-Danish浓缩瓶，20mL；
微量注射器：10μL。
4.试样的抽取与制备
4.1.检验批
以不超过2500件为一检验批。
同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格、等级等。
4.2.抽样数量
批量，件 | 最低抽样数，件 |
1～25 | 1 |
26～100 | 5 |
101～250 | 10 |
251～500 | 15 |
501～1000 | 17 |
1001～2500 | 20 |
4.3.抽样方法
按规定的抽样件数，随机抽取，逐件开启。从每件内抽取一袋，作为原始样品。原始样品的总重量不少于2kg。装入清洁的容器内，加封后，标明标记，并及时送实验室。
如每件中无小包装或有小包装但重超过2kg者，则可用灭菌的锋利刀在抽出的包件中，每件割取不少于100g，作为原始样。混合后置于清洁容器内，作为混合原始样。混合原始样的重量不少于2kg。加封后，标明标记，并及时送实验室。
4.4.试样制备
从所取全部原始样中分取出代表性样品1kg，放入绞肉机中充分绞碎、混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内密封，作为试样，并标明标记。
4.5.试样保存
将试样于－18℃以下冷冻保存。
注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染和发生残留物含量的变化。
5.测定方法
5.1.提取
称取5g试样(精确至0.01g)于50mL离心管中，加入1mL浓盐酸、5g无水硫酸钠和2.5mL饱和硫酸钠溶液，在旋涡混匀器上混匀5min。再加入5mL正己烷，在旋涡混匀器上提取5min，于3 000r/min离心2min。将正己烷层移至25mL离心管中。残渣再用5mL正己烷以同法提取一次，合并正己烷层。
5.2.净化
于正己烷提取液中加入2g无水硫酸钠，加塞，置于－20℃冷贮2h，将正己烷溶液倾入20mL浓缩瓶中，在多功能微量化学样品处理仪上，于50℃挥发定容至1.00mL，此溶液供气相色谱测定。
5.3.测定
色谱条件
色谱柱：HP-5，10m×0.53mm(内径)，膜厚2.65μm，或相当的色谱柱；
柱温：150℃；
进口样温度：200℃；
检测器温度：250℃；
载气、尾吹气：氮气(纯度≥99.99％)；载气流速：6mL/min；尾吹气流速50mL/min；
进样方式：直接进样；
进样量：2μL。
5.3.2.色谱测定
根据样液中二溴磷的含量情况，选定峰高相近的标准工作液。标准工作液和样液中二溴磷的响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，二溴磷的保留时间约为11.5min。标准品的色谱图见附录A中图A1。
5.4.气相色谱-质谱确证
气相色谱-质谱条件
色谱柱：HP-5MS，30m×0.25mm(内径)，膜厚0.25μm，或相当的色谱柱；
载气：氦气，纯度≥99.995％，流速0.5mL/min；
色谱柱温度：程序升温：100℃保持1min，以10℃/min速度升至150℃保持20min；
进样口温度：200℃；
色谱-质谱接口温度：280℃；
进样量：3μL；
进样方式：无分流，1min后开阀；
电离方式：EI；
电离能量：70eV；
电子倍增器电压：自动调谐加200V；
测定方式：选择离子监测方式(SIM)；
选择监测离子(m/z)：301、185、109amu；
溶剂延迟：6min。
5.4.2.质谱确证试验
对标准溶液及样液均按5.4.1规定的条件进行测定。如果样液中与标准溶液相同的保留时间有峰出现，则对其进行质谱图分析。在上述色谱-质谱条件下，二溴磷保留时间约为17.5min。标准品的色谱、质谱图见附录B中图B1。
5.5.空白试验
除不加试样外，均按上述测定步骤进行。
6.结果计算
用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中二溴磷的残留含量：
X＝ | h·c·V | …………………………(1) |
hs·m |
式中：X——试样中二溴磷残留含量，mg/kg；
h——样液中二溴磷的色谱峰高，mm；
hs——标准工作液中二溴磷的色谱峰高，mm；
c——标准工作液中二溴磷的浓度，μg/mL；
V——样液最终定容体积，mL；
m——最终样液所代表的试样量，g。
注：计算结果需扣除空白值。
7.低限、回收率的测定
7.1.测定低限
本方法的测定低限为0.05mg/kg。
7.2.回收率
猪肉中二溴磷的添加浓度及其回收率的实验数据：
0.05mg/kg时，回收率为.2％；
0.30mg/kg时，回收率为94.7％；
1.0mg/kg时，回收率为98.8％。
8.来源：
SN 0706—1997